繁華大都會紐約，光影交錯的人間樂土，相應有層出不窮的罪惡侵蝕著這片土地。小青年彼得·帕克（Christopher Daniel Barnes 配音）和唯一的親人梅嬸（Linda Gary 飾）相依為命，如許許多多美國青年一樣穿行在繁忙的鬧市街頭。可就是這個平凡無奇的大男孩，卻被一隻受過輻射的蜘蛛咬中，繼而改變了命運。在此之後，彼得發現他具有種種神奇的能力，而能力的增長又促使他成為獨立於司法之外的正義戰士，以蜘蛛俠的名頭和各種各樣的惡勢力展開鬥爭。在此之後，毒蠍、章魚博士、毒液、綠魔等可怕的對手交替登場，正邪雙方在紐約各個角落展開接二連三的較量。在此期間，彼得還必須兼顧他英雄的另一麵，小心平衡著和女友瑪麗以及工作之間的關係。